電熱培養(yǎng)箱的保養(yǎng)方法以及其特點

 

　　1、顯微鏡：倒置式顯微鏡是細胞培養(yǎng)實驗室日常工作常規(guī)*設備，主要用于日常了解細胞的生長情況并觀察有無污染發(fā)生。如資金允許，建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等，可隨時拍攝并記錄細胞生長情況。

 

　　超凈工作臺：目前絕大部分細胞實驗室使用超凈工作臺實現(xiàn)無菌操作，具有操作簡單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。超凈工作臺主要有兩種——側流式（垂直式）和外流式（水平層流式）。工作原理一般是將室內空氣經粗過濾器初濾，由離心風機壓入靜壓箱，再經空氣過濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū)，從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。

 

　　2、（1）側流式工作臺：空氣凈化后的氣流由左或右側通過工作臺面流向對側，也有從上向下或從下向上流向對側，形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌，工作臺結構為封閉式；

 

　　（2）外流式工作臺：凈化后的空氣面向操作者流動，因而外方氣流不致混入操作，工作臺結構為開放式，但進行有害物質實驗操作對操作者不利。超凈工作臺應需要定期請有關部門檢查潔凈度，符合要求的超凈工作臺其潔凈度應達到100級，用塵埃粒子計數儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數量不應超過3.5個/L；空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s；細菌菌落數平均<1個，根據無菌狀況必要時需要置換過濾器。

 

　　3、培養(yǎng)箱：體外培養(yǎng)的細胞和體內細胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，一般適生長溫度為37℃，溫差變化不應超過±0.5℃。溫度升高2℃時，變不利于細胞生存，溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此，可控溫的恒溫培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱是選擇。

 

　　（1）恒溫培養(yǎng)箱：應選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱，此類培養(yǎng)箱靈敏度高，溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜，其缺點是只宜于作密閉式培養(yǎng)。

 

　　（2）CO2培養(yǎng)箱：目前多數的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH，適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時，為使培養(yǎng)瓶內與外界保持通氣狀態(tài)，可將瓶蓋略微旋松，為避免細胞被污染，使用這種培養(yǎng)方式時，培養(yǎng)箱內空氣必須保持清潔，需定期用紫外線照射或酒精消毒，同時培養(yǎng)箱內應放置盛有無菌蒸餾水的水槽，防止培養(yǎng)液蒸發(fā)，保持箱內相對濕度在100%。

 

　　（3）細胞培養(yǎng)耗材：培養(yǎng)細胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶，萊貝在本篇不做詳細介紹，這部分知識會在實驗室耗材知識部分作重點介紹。

 

　　4、烘箱（干燥箱）：電熱培養(yǎng)箱用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時，烘箱內溫度一般要達到160℃以上，通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好，缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始，至100℃時，停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門，以免驟冷導致玻璃器皿破裂，應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。

 

　　5、水純化裝置：細胞培養(yǎng)對水的質量要求較高，細胞培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)相關液體的配制用水以及清洗細胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經過嚴格的純化處理。目前有多種純化方法相結合，可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便，可掛壁式、臺式、可配儲水箱、也可直接用分液槍、還可根據各類實驗用水要求選擇配置殺菌功能，有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，更有可有效去除掉熱源、內毒素的超濾型純水裝置。

 

　　6、冰箱：電熱培養(yǎng)箱備設備，應，不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質，且應保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱。（1）普通冰箱：儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品，可短期保存組織樣本。（2）-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱：用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時期存放的制劑，如酶、血清等。